近期恒遠(yuǎn)經(jīng)常接到客戶的：同一條件下，除了測(cè)的指標(biāo)不一樣，為什么有張膜顯影，有張未顯影？？？
上海恒遠(yuǎn)技術(shù)分析：在同一條件下，如果一張膜顯影，一張膜未顯影，可以逐一查找原因：
1、你是否兩張膜上都設(shè)有陽(yáng)性對(duì)照？如果有，一張膜有信號(hào)，一張沒(méi)信號(hào)，可能是操作過(guò)程中有問(wèn)題（可能原因是（1）、你結(jié)合底物會(huì)不會(huì)有問(wèn)題，即沒(méi)有充分結(jié)合好，或者結(jié)合時(shí)間太短，（2）、你要確定兩張膜都是用新的底物反應(yīng)液，（3）、就是沒(méi)有信號(hào)的膜會(huì)不會(huì)壓片時(shí)間太短，如果使用儀器掃片就不存在這種問(wèn)題，）所以原因比較多，你只能逐一排查。
2、如果沒(méi)有設(shè)對(duì)照，這個(gè)問(wèn)題就更復(fù)雜，而且解決起來(lái)也不科學(xué)。同時(shí)，要控制兩個(gè)膜條件*一樣是很困難的。即使你是同時(shí)做的兩個(gè)，那一定有一個(gè)先上樣，一個(gè)后上樣，而且你跑膠的時(shí)候會(huì)發(fā)現(xiàn)，兩塊膠上的條帶速度肯定是不一樣的，轉(zhuǎn)膜兩個(gè)膜放的位置也肯定不一樣，等等，也許這些小問(wèn)題都不能導(dǎo)致你壓片不出條帶，我只是想說(shuō)，兩個(gè)條件不可能*相同，western blot實(shí)驗(yàn)就是重復(fù)性比較差，所以一個(gè)出一個(gè)不出，這樣是正常的。
會(huì)員_a.png)