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技術(shù)文章
傳統(tǒng)ELISA和Instant ELISA比較
傳統(tǒng)ELISA(BMS215-2)
Instant ELISA (BMS215INST)
一、試劑配制:
1)wash buffer ;
2)Assay Buffer;
3)Biotin conjugate;
4)Streptavidin-HRP;
5)Standard;
6)Control(可做可不做)
Wash buffer
二、操作步驟:
根據(jù)待測樣本的數(shù)量和所需標準品數(shù)量確定好所需的微孔數(shù)量之后,
1)洗板2次;
2)在預(yù)設(shè)的標準品孔中加入標準品;
3)在樣本孔和空白對照孔中加Assay buffer;
4)在樣本孔中加樣本;
5)在所有孔中加Biotin-conjugate;
6)室溫孵育2小時;
7)洗板3次;
8)各孔加入Streptavidin-HRP,然后室溫孵育1小時;
9)洗板3次;
10)各孔加入顯色底物,然后室溫孵育約10分鐘;
11)各孔加入終止液終止反應(yīng);
12)上機讀板。
1)每孔加入雙蒸水;
2)在樣本孔中分別加入待測樣本;
3)室溫孵育3小時;
4)洗板6次;
5)每孔加顯色底物,然后室溫孵育約10分鐘;
6)每孔加終止液終止反應(yīng);
7)上機讀板
Bender Medsystems ELISA試劑盒比較(以human IFN-γ為例)
Instant ELISA
High sensitivity
ELISA
Conventional ELISA
Matched antibody
(Module sets)
試劑盒
特點
試劑盒成分齊全;步驟大大簡化;結(jié)果;重復(fù)性高
試劑盒成分齊全;檢測到更低的濃度;靈敏度高;省去了包被步驟
試劑盒成分齊全;省去了包被步驟
可進行大批量的檢測
成分
成分齊全,不需添加其他試劑
成分齊全,不需添加其他試劑,另含放大因子I&II
含包被抗體、檢測抗體、標準品和酶標親和素
添加試劑
無
分析緩沖液,樣本稀釋液,TMB,終止液、洗液,ELISA板等
預(yù)包被
情況
包被抗體、檢測抗體、標準品和酶標親和素
檢測孔數(shù)
128 Tests
96 Tests
10×96 Tests
檢測時間
190min
240min
195min
195min(除包被隔夜外)
操作步驟
3步
6步
4步
5步
孵育步驟
1步
洗滌步驟
檢測范圍
100-1.5 pg/ml
10-0.15 pg/ml
100
1.5 pg/ml
靈敏度
1 pg/ml
0.06 pg/ml
<1.5 pg/ml
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