我們有不少客戶在養(yǎng)細(xì)胞需要用到血清,可是不知道下面這些關(guān)于飼養(yǎng)細(xì)胞需要的血清的知識(shí)是不是每位客戶都知道。對(duì)于初學(xué)者本章內(nèi)容更是受益匪淺。我司技術(shù)詳細(xì)整理血清方面的知識(shí)供大家一起分享。
◆采血
胎牛血清采用心臟穿刺的方法采血。馬血清采自供體動(dòng)物。新生牛血清采
自出生10至14天的小牛。全部按照工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)采血。
◆處理
全部血清:收集的血液均在冷藏條件下處理。血清和凝塊分離后立即將血清合并
并冷凍。只有符合伯血清才被接受作進(jìn)一步處理。
熱滅活血清:熱滅活是在56℃水浴中嚴(yán)格控溫30分鐘
超低1gG胎牛血清:GIBCO持有從血清中通過(guò)層析方法去除G球蛋白的。經(jīng)過(guò)這種程序處理的血清只有極低的1gG濃度(小于5mg/ml),但保持了血清的全部生物學(xué)活性。
透析血清:用12,000~14,000截留分子量的透析膜對(duì)0.15M的NaCl進(jìn)行透析直到葡萄糖水平低于5mg/md(用葡萄糖氧化酶/過(guò)氧化物酶方法檢測(cè)。)為防止沉淀和血清中多肽的滅活,不進(jìn)行過(guò)度的透析,因此一些小分子量的可透析成分如氨基酸不一定*去除。
伽馬射線照射血清:通過(guò)伽馬射線照射以滅活各種動(dòng)物血清中的病毒和支原體的方法已經(jīng)得到證實(shí)。研究證實(shí)照射劑量在30-45KGy為宜。這一數(shù)據(jù)符合的歐洲和美國(guó)FDA的標(biāo)準(zhǔn),證實(shí)血清被照射后物理化學(xué)特性和細(xì)胞培養(yǎng)表現(xiàn)沒(méi)有改變。
◆保存和解凍血清
血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放于4℃不可超過(guò)一個(gè)月。解凍血清時(shí),應(yīng)先將血清置于2-8℃冰箱,并經(jīng)常均勻使之溶解,然后在室溫放置使之升溫,絕不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會(huì)增加。血清在解凍或熱滅活后,應(yīng)按使用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。