昨日上午我司吳在詢盤的留言上看到有客戶咨詢關于實驗正確步驟是怎樣的?在經(jīng)過一番交流后，我司吳特意整理出實驗中的整個操作流程及注意事項與親們分享：
前期準備工作：
實驗前樣本和試劑盒室溫平行1小時，如果樣本是凍存樣本，應提前拿到2-8攝氏度進行解凍（不建議直接室溫解凍）
準備好實驗所需耗材，蒸餾水（去離子水）。
操作流程描敘：
1，將要進行實驗的版孔進行設定好，標準品5個點，每個點設定平行，需要用到10個孔，空白只需1個孔。剩下孔可以做為樣本孔
2，稀釋標準，準備好5個EP管，然后在每個EP管中加入150微升標準稀釋液，編上編碼，分別為1，2，3，4,5，在1號管中加入150標準品，用槍頭反復吹打10次左右（注意控制幅度不要過大容易產(chǎn)生氣泡）如果有渦旋儀可以在渦旋儀上渦旋5秒左右，然后換槍頭，在1號管中取150微升加入到2號管，后面過程一次類推。zui后稀釋完，前面4個管中每管液體在150微升，5號管為300微升。濃度是從大到小。
3，標準、樣本、空白加樣：標準是每個濃度點2個孔（做平行），每孔加入50微升，加樣過程中注意換槍頭，樣本孔中每孔加入50微升，加樣過程中注意換槍頭，空白孔加入50微升蒸餾水。特別要說明的是，標準加樣和樣本加樣盡量控制在15分鐘內(nèi)加完，如果時間拖的太長，會導致前面孔先反應后面孔才開始反應，這樣數(shù)值偏差過大。加完樣后蓋上封板膜，至37攝氏度孵育30分鐘.
4，洗版，在孵育過程中可以將洗滌液配好，20ml30倍濃縮洗滌液用蒸餾水或者去離子水定容到600ml即可。每孔加入250-300微升的洗滌液（不要漫過版孔），（如果有震蕩儀的話，可以講板子放入震蕩儀上5秒左右，然后靜止三十秒，沒有請忽略次過程）將板子在桌子上晃動5秒左右，然后靜置30秒，甩干，拍板。說明：甩干過程盡量要快，1秒內(nèi)就可以完成，不要慢慢傾斜倒掉液體，直接翻板甩掉液體即可。拍板過程需要在桌子上墊一層吸水紙或者濾紙，版孔朝下拍幾下，拍干區(qū)別主要看吸水紙和濾紙上沒有明顯的水漬為完成。
5，每孔加入50微升的酶標試劑，此處在空白孔中不需要加（空白孔為空），孵育30分鐘。
6，洗版同步驟4
7，顯色，先每孔中加入50微升的顯色A液，然后每孔中加入50微升顯色B液。避光37攝氏度顯色15分鐘
8，終止，每孔加入50微升的終止液，注意，加完終止液必須在15分鐘內(nèi)讀數(shù)，超過時間讀數(shù)無效。在規(guī)定時間內(nèi)讀數(shù)都是有效的。
至此，整個實驗結束。
需要額外提醒的是：在做完整個實驗過儀器之前，儀器預熱半小時，這個計算好時間，也可以直接將儀器一直開著，直到整個實驗結束。
在加液過程中不要使槍頭觸及到板子底部，一般槍頭都懸空，可以將槍頭靠在孔邊緣，但槍頭尖懸空，如果槍頭上殘留液體看整體多少量，不要吹打下去。特別忌諱在版孔內(nèi)壁流向版孔。整個加液過程不要產(chǎn)生氣泡。（洗滌液除外）
